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為什么神經科學家結合組織病理學和基因表達很



在這次采訪中,塞德里克·烏廷科(Cedric Uytingco)討論了能夠可視化神經系統樣本中基因表達模式的關鍵優勢。為什么神經科學家結合組織病理學和基因表達很重要?

為什么神經科學家結合組織病理學和基因表達很重要

傳統上,神經科學家使用組織學根據已知的細胞形態和位置推斷細胞類型。但是,僅使用此分類會模糊理解正常發育和疾病病理所必需的信息。

對組織中基因表達模式和細胞間相互作用的了解提供了更多的背景信息,擴大了可獲得的見解并加速了生物學發現。

這對其他哪些研究領域特別有用?

將基因表達與組織學聯系起來對于許多研究應用程序非常有用,研究人員希望深入研究組織結構,生物學功能和疾病病理學。除了神經科學,研究癌癥,免疫腫瘤學,免疫學和發育生物學的研究人員還將發現該技術有用。

嘗試使用傳統方法在空間上可視化基因表達時,科學家面臨的主要挑戰是什么?

檢查基因表達和形態的傳統技術(例如免疫組織化學或原位雜交)依賴于探測相對少量已知靶標的蛋白質和/或核酸。這需要細胞標記物的先驗知識,并且通過將研究限于已知靶標,研究人員可能會缺少有關可能具有生物學意義的細胞亞型的信息。

檢查廣泛的生物標志物需要大量的切片,分別用靶標或低復雜量的探針進行探測,最后,所有切片都需要成像并手動分析。在可用組織數量有限的情況下,甚至不可能分析廣泛的靶標。

什么是空間基因表達譜分析,它如何克服其中的一些問題?

通過結合組織學和完整組織切片中的總mRNA表達,空間基因表達譜提供了基因表達模式的視圖。無需事先了解細胞亞型或細胞標記物即可表征細胞群體,從而可以深入了解基因表達異質性,并發現新型生物標記物。

這項技術可從單個區域獲得大量定量信息,包括基因表達模式,共表達信息以及對信號通路的分子洞察。

技術是如何開發的?

Ståhl等人首先描述了將無偏基因表達數據與來自同一組織切片的組織學信息相結合的能力。在科學誰再建立空間轉錄組從科學分拆為生活實驗室,這是我們在2018年11月收購。

一旦成為10x Genomics的一部分,開發人員就會加倍努力以開發出更強大,易于使用的解決方案,并具有更好的空間分辨率,更高的靈敏度和自動化的分析工具。不到一年后,10x Genomics將Visium空間基因表達解決方案推向市場。

Visium空間基因表達解決方案如何工作?

將新鮮冷凍的組織切成薄片,然后放在載有數千個條形碼斑點的載玻片上,其中包含數百萬個具有該斑點唯一的空間條形碼的捕獲寡核苷酸。對組織切片進行成像,然后進行處理以釋放與捕獲寡核苷酸結合的mRNA。

載玻片上發生逆轉錄反應,生成用于制備標準短讀文庫的cDNA。條形碼化的cDNA文庫可以映射回特定位置,從而創建一層基因表達數據,可以將其與組織切片的顯微鏡圖像相結合。

空間基因表達數據如何促進我們對神經系統疾病和健康的中樞神經系統的了解?

神經系統非常復雜,從相對同質的祖細胞群體發展為控制運動和感覺功能以及認知的多樣化細胞網絡。弄清該系統的復雜性,不僅需要了解正在發生的事情,而且還需要了解神經系統的不同區域控制不同功能的位置。

利用空間基因表達譜以無偏見的方式探索基因表達模式,加深了我們對有助于正常發育和功能的因素以及神經失調的潛在機制的理解。

該技術最近被用于在ALS中進行時空基因表達。為什么這項研究意義重大?

Silas Maniatis及其同事的論文檢查了ALS患者死后組織中的基因表達以及該疾病的小鼠模型。他們的研究證實了已知與ALS有關的幾種基因的基因表達發生了變化,但還發現了與小膠質細胞活化和自噬有關的基因的其他變化。

另外,它們能夠利用形態學來繪制基因表達沿脊髓的后尾軸以及白和灰質之間的變化。這項研究提供了對ALS的潛在細胞和分子機制的見解。

對于該領域和其他神經退行性疾病的研究,該技術如何發揮作用?

該技術的一個主要優點是可以從單個組織切片中獲取大量信息,這對于組織數量有限的研究特別有利。

研究人員現在將能夠檢查組織中的基因表達模式,并利用獲得的信息來鑒定和表征在疾病中起作用的新生物標志物和信號傳導途徑,最終使人們更好地了解疾病的原因和進展。他們可以利用從這些研究中獲得的信息來開始提出以前不可能的問題。

除ALS外,該技術如何用于改善我們對阿爾茨海默氏病的知識?




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